对于口服固体制剂,进入胃肠道后,药物首先从制剂中释放出来,然后经人体的吸收(Absorption)、分布(Distribution)、代谢(Metabolize)、排泄(Excretion)。药物从制剂中释放出来就叫溶出,这是体内溶出。在体外模拟体内环境进行的溶出就叫体外溶出。平时说的“溶出”大都是指体外溶出。
溶出的作用:
通过体外溶出实验来预测体内行为,增大生物等效性实验成功的概率;保证药品批内、批间质量一致性;指导处方、工艺的开发;药品发生变更后用以评价药品的质量 。
生物药剂学分类(BCS) :
第一类药物:高溶解性 高渗透性;第二类药物:低溶解性 高渗透性 ;
第三类药物:高溶解性 低渗透性;第四类药物:低溶解性 低渗透性 ;
高溶解性药物:最高剂量规格的制剂能在pH值1.0-8.0的250ml或更少体积的水溶液中溶解的药物。
高渗透性药物:是指绝对生物利用度超过85%的药物。
对于第一类药物,如果其溶出在15min内可以达到85%以上,那么可以申请BE减免。如左氧氟沙星片。胃排空的速度一般在15-20min,如果溶出比它还快,那么保证了生物利用度不受胃排空的影响;
对于第二类药物,需要考虑如何增溶,比如说微粉化、固体分散体、表面活性剂等;
对于第三类药物,应考虑如何增加其渗透性;
对于第四类药物,不适合做成口服制剂。
在研发阶段,溶出方法的开发与选择非常重要。如何获得一个好的溶出方法?
如果产品已经收载到药典,那么方法可以参照药典方法,或改进药典方法,但是后者做方法验证的时候需要做两遍,一遍是药典的,一遍是改进的,然后进行对比。
如果药典上面还没有,看FDA是否有推荐方法,或者去reviews的临床信息里面找,或者专利中也可能有。
上述两种方法一般都是放行检测方法,并不一定适合研发,有可能需要进一步摸索。
如果上述两种方法不存在,那么就要自己摸索了。这时一般需要做4条曲线。
首先考察原料药的溶解性及溶液稳定性,寻找符合漏槽条件的溶出介质及pH桨法还是篮法的选择,对于桨法是否加沉降篮?转速的选择,50rpm、75rpm还是100rpm,还见过60rpm的?表面活性剂是否需要?需要的种类?如果需要,需要多少?溶出介质的体积的选择,时间点如何选取?
例一, 制剂的规格为100mg,API在pH1.2的条件下稳定,且溶解度有0.001g/ml,那么制剂中API全部溶解需要100ml的溶液,那么要想符合漏槽条件,溶出介质至少需要300ml。所以对于一般的900ml的溶出杯毫无压力。
例二, 如果药物在体内达峰时间在1h左右,那么释放基本在胃部及十二指肠部。所以应选择酸性条件做溶出。
例三, 酸性条件下,API降解,考虑降解后产物能否被检测,HPLC还是紫外。如果可以检测,那么不影响溶出结果,如果不能检测,应考虑其与对照制剂的降解程度是否相同,或者说明一下由于情况复杂,无法对比,故酸性条件下的溶出取消。
如果转速在50转的时候,溶出的批间差异比较大,当然含量是好的,那么可以考虑增大转速试一试。
对于难溶性药物,如果不加表面活性剂几乎不溶或是略溶,那么可否在不加表面活性剂的情况下,直接对比曲线,使其f2大于50?
根据ICH Q6,对于普通口服固体制剂,一般都要求溶出检测,当然比如说BCS I类药物,有时可通过崩解测试代替溶出测试。
根据USP<711>DISSOLUTION,可知Q代表个论中的标示量,如15min不低于85%,这里面的85%就是Q。
速释制剂
阶段 | 片数 | 接受标准 |
S1 | 6 | 每个点都不小于Q+5% |
S2 | 6 | 12片的平均值不小于Q,没有小于Q-15% |
S3 | 12 | 24片的平均值不小于Q,小于Q-15%的不超过2片,不得有小于Q-25% |
速释制剂-pooled sample
阶段 | 片数 | 接受标准 |
S1 | 6 | 每个点都不小于Q+10% |
S2 | 6 | 12片的平均值不小于Q+5% |
S3 | 12 | 24片的平均值不小于Q |
缓释制剂
阶段 | 片数 | 接受标准 |
L1 | 6 | 每个单点都在相应的范围内,最后一个单点应不小于相应的量 |
L2 | 6 | 12片的平均值都在相应的范围内,最后一个点平均值应不小于相应的量; 单点没有超出范围(上下限)10%的,最后一个单点不应小于相应的量的10% |
L3 | 12 | 24片的平均值都在相应的范围内,最后一个点的平均值应不小于相应的量; 超出范围(上下限)10%的单点不超过两个,最后一个单点小于相应量的10%的不超过两个; 单点没有超出范围(上下限)20%的,最后一个单点不应小于相应的量的20% |
举例,缓释制剂E
时间 | 1h | 2h | 4h | 8h |
标准 | NMT 15% | 20-30% | 45-60% | NLT85% |
1. | 7.0 | 25.0 | 50.0 | 90.0 |
2. | 8.0 | 24.0 | 49.0 | 95.0 |
3. | 9.0 | 25.0 | 50.0 | 84.0 |
4. | 10.0 | 26.0 | 48.0 | 91.0 |
5. | 9.0 | 25.0 | 52.0 | 89.0 |
6. | 8.0 | 24.0 | 51.0 | 96.0 |
7. | 7.0 | 25.0 | 50.0 | 90.0 |
8. | 8.0 | 24.0 | 49.0 | 95.0 |
9. | 9.0 | 25.0 | 50.0 | 88.0 |
10. | 10.0 | 26.0 | 48.0 | 91.0 |
11. | 9.0 | 25.0 | 52.0 | 89.0 |
12. | 8.0 | 24.0 | 51.0 | 96.0 |
平均值 | 8.5 | 24.8 | 50.0 | 91.2 |
单点超出上下限20%的,直接不合格,单点超出上下限10%-20%之间的,如果超过2片,直接不合格,如果小于2片,直接进入L3。 只有单点超出范围在小于10%的时候,才能进入L2阶段。
肠溶制剂-酸介质
阶段 | 片数 | 接受标准 |
A1 | 6 | 单片溶出不能超过10% |
A2 | 6 | 12片溶出平均值不超过10%,单片不能超过25% |
A3 | 12 | 24片溶出平均值不超过10%,单片不能超过25% |
肠溶制剂-碱介质
阶段 | 片数 | 接受标准 |
B1 | 6 | 单片溶出不少于Q+5% |
B2 | 6 | 12片溶出平均值不小于Q,单片不小于Q-15% |
B3 | 12 | 24片溶出平均值不小于Q,小于Q-15的不多于2片,没有小于Q-25%的 |
如果药典收载了该品种溶出标准,则依据药典制定标准 ;如果药典未收载该品种的溶出标准,但可获得其参考标准,则可依据此制定标准。 如果以上两者都没有,则可参考USP<711>DISSOLUTION中对于速释、缓释和肠溶的要求来制定标准。但此时应该做不同条件下的溶出研究,如不同介质、转速、加不加表面活性剂等等。
不论使用哪种方法,都需经过验证,如果是药典改进方法,则需进行对比验证。对于成品放行标准和稳定性标准制定的时候有两种情况:
一、 放行标准严于稳定性标准
二、 放行标准与稳定性标准相同
对于第一种情况,将放行标准定的严格一点,作为内控标准,很好,但是万一哪天测试结果超出放行标准,但是还在稳定性标准范围内,自找麻烦。
对于第二种情况,实际上等于是放宽了放行标准,将放行标准放宽到稳定性标准,这样做未尝不可。 不知大家对此的看法如何?
溶出对比 :
溶出对比有两个目的,一是考察自研制剂和对照制剂的体外相似程度,为通过BE;二是为了BE减免,同组成等比例处方的多规格制剂,部分规格BE减免。
如果原研制剂只有一个规格,那么就考察其曲线的相似程度,越相似,通过BE的概率越大。
如果原研制剂为多规格,例如三个规格50mg,100mg,200mg,其处方组成相同,且各成分的用量成比例,200mg规格为BE规格,那么通过溶出对比,可以减免100mg和50mg两个规格的BE实验。
溶出对比时,一般要求做12片,然后对比f2,大于50%即认为相似。
例如:
处方组成相同且等比例 | |||
规格 | 50mg | 100mg | 200mg |
API | 50 | 100 | 200 |
辅料 | 50 | 100 | 200 |
总 | 100 | 200 | 400 |
溶出对比(BE规格为50mg) | ||
自研制剂50mg | VS. | 原研制剂50mg |
自研制剂100mg | VS. | 自研制剂50mg |
自研制剂200mg | VS. | 自研制剂50mg |
原研制剂100mg和原研制剂200mg的溶出也要做,但此两个规格可以不用做溶出对比。 |
溶出对比(BE规格为200mg) | ||
自研制剂200mg | VS. | 原研制剂200mg |
自研制剂100mg | VS. | 自研制剂200mg |
自研制剂50mg | VS. | 自研制剂200mg |
原研制剂100mg和原研制剂50mg的溶出也要做,但此两个规格可以不用做溶出对比。 |
判断曲线相似性的方法有:
非模型依赖法:f2相似因子法和多变量置信区间法。后者适用于批内溶出RSD大于15%的药品。不知有使用过此方法的没?
模型依赖法:使用一些拟合溶出曲线的数学模型,如现行模型、二次模型、对数模型、概率模型和威布尔模型等。